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南京森贝伽生物科技有限公司品牌商
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自营
Sbjbio
试剂/耗材/技术服务
已认证品牌介绍
京森贝伽生物科技有限公司（NanJing SenBeiJia Biotechnology Co.,LTD.），是一家集研发、生产、销售为一体的高新技术企业，专注于生命科学和生物技术研究，产品涵盖分子生物学、蛋白质组学、免疫学、细胞生物学等研究和应用领域。公司总投资超过 2000 万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。森贝伽生物自主研发的 ELISA 试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
代理
Santa Cruz
抗体
已认证品牌介绍
SANTA CRUZ公司是全球最大的抗体生产厂商之一，目前公司提供二万余种研究用的第一抗体，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。
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SANTA CRUZ公司是全球最大的抗体生产厂商之一，目前公司提供二万余种研究用的第一抗体，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。
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京森贝伽生物科技有限公司（NanJing SenBeiJia Biotechnology Co.,LTD.），是一家集研发、生产、销售为一体的高新技术企业，专注于生命科学和生物技术研究，产品涵盖分子生物学、蛋白质组学、免疫学、细胞生物学等研究和应用领域。公司总投资超过 2000 万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。森贝伽生物自主研发的 ELISA 试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
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SANTA CRUZ公司是全球最大的抗体生产厂商之一，目前公司提供二万余种研究用的第一抗体，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。
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公司新闻/正文
实验方法学(1)
545 人阅读发布时间：2017-01-10 17:52
实验方法学(1)
新年将近，南京森贝伽产品火热促销，价格优惠，质量保证，产品买的多折扣就多，另有礼品赠送。我司主营现货产品有ELISA试剂盒、标准品、血清、细胞株、染色液、培养基、抗体等，欢迎来电订购！本公司产品仅用于科研使用，不供临床实验。一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆:收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
3、全血收集:收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接定量吸取全血，用冷双蒸水制备溶血液后用于不同指标的检测；也可定量吸取全血，转入EP管，低温冻存（温度越低越好），测定之前解冻并按比例加入冷双蒸水制成溶血液用于检测。
4、红细胞收集：收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，直接离心弃掉血浆，留下层红细胞，加入3倍体积的生理盐水，轻轻颠倒混匀，500～1000转/分,离心10分钟，弃上清留沉淀红细胞,重复2～3次,至上清液无色为止（洗涤红细胞）。
①、直接定量吸取红细胞，按比例加入冷双蒸水制成溶血液待测；
②、定量吸取红细胞，转入EP管，立即低温冻存（温度越低越好），测定之前解冻，并按比例加入冷双蒸水制成溶血液用于检测(解冻后部分红细胞会破裂,因此样本冷冻保存之前必须进行定量)。
三、动物组织样本的前处理:
1、取组织块（0.1g～0.2g）在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重，放入匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质（推荐使用0.86%的生理盐水）于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种：手工匀浆，机器匀浆，超声粉碎。
①、手工匀浆：将玻璃匀浆管置于冰水浴条件下，手动匀浆，30秒/次，间隔30秒，重复6～8次，制成10%的匀浆液。
②、机器匀浆：用机械式匀浆机（组织捣碎机或内切式匀浆机），8000～10000转/分，冰水浴条件下，10秒/次，间隙30秒，连续3～5次。（皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间）
③、超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用400安培，5秒/次，间隙10秒反复3～5次。
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片，显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.（测定相应指标的同时需测一下相应样本的蛋白浓度，总蛋白测试盒本所有售）
四、植物组织样本的前处理:
1、匀浆介质：
一般采用磷酸盐缓冲液(0.1mol/LpH7.4)或生理盐水（0.86%或0.9%）,客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
2、组织匀浆液的制备：
①、手工匀浆：取组织块（0.2g～0.5g）在冰冷的匀浆介质中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入匀浆管中，按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块，将玻璃匀浆管置于冰水浴条件，手动匀浆，30秒/次，间隔30秒，重复6～8次，制成20%的匀浆液。
②、机器匀浆：取组织块（0.2g～0.5g）在冰冷的匀浆介质中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入匀浆管中，按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块，机械式匀浆机（组织捣碎机或内切式匀浆机），10000～15000转/分，冰水浴条件下，15秒/次，间隙30秒，连续3～5次，制成20%的匀浆液。
③、液氮研磨：取组织块（0.2g～0.5g）在冰冷的匀浆介质中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入研钵中，用眼科小剪尽快剪碎组织块，加入液氮研磨至粉末状（研磨要迅速），加入匀浆介质，充分抽提，制备成20%的匀浆液。
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片，显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
匀浆上清液的制备：将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3500转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定（测定相应指标的同时需测一下相应样本的蛋白浓度，总蛋白测试盒本所有售）。