南京森贝伽生物科技有限公司品牌商

11

手机商铺

qrcode
商家活跃:
产品热度:
  • NaN
  • 0
  • 0
  • 2
  • 2
品牌商

南京森贝伽生物科技有限公司

入驻年限:11

  • 联系人:

    森贝伽生物

  • 所在地区:

    江苏 南京市

  • 业务范围:

    试剂、技术服务、耗材、细胞库 / 细胞培养

  • 经营模式:

    经销商 生产厂商

在线沟通
推荐产品

组织保存液

品牌:Biochannel

¥450

咨询

Medium 199培养基

品牌:南京森贝伽生物科技

¥70

咨询

DMEM (高糖)

品牌:南京森贝伽生物科技

¥70

咨询
查看全部产品

公司新闻/正文

人脂肪间充质干细胞的分离培养

494 人阅读发布时间:2024-06-07 14:48

 脂肪干细胞(ADSCs)是一类来源于脂肪组织的间充质干细胞,具有自我更新与多种分化潜能,通过分离培养可以在体外稳定增殖,在特定的诱导条件下,可以被分化诱导为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞等。

 
  1. ADSCs细胞组织获取
根据分布位置可以将人体脂肪分为内脏脂肪和皮下脂肪两种形式,通常情况下,皮下脂肪约占人体总脂肪量的85%,内脏脂肪占15%。目前,ADSCs主要通过局部脂肪切除术及抽脂术后的脂肪组织中获取,有学者认为供者组织状态及年龄等也是影响细胞活性的重要因素,通常情况下,供者状态越佳,细胞增殖效果越好。
 
  1. ADSCs细胞分离
目前常用的是组织酶消化法,将脂肪组织剪碎后采用胶原酶或胰酶消化、过滤离心后,使用含血清的培养基将沉淀重悬后接种于培养瓶中。分离过程中需注意要将脂肪层面上的多余组织和血管去除干净,为保证酶消化效果,脂肪尽可能剪碎,在用PBS反复冲洗,以确保红细胞去除干净。
 
  1. ADSCs细胞培养
将细胞沉淀在含20% 胎牛血清的DMEM/F12培养基中混匀,接种在6孔板或培养瓶中,置于37℃,5% Co2培养箱中培养,待观察到细胞贴壁一定密度后进行首次换液,换液前可对细胞进行清洗一次,在加入新培养液。待细胞生长至80% 融合时进行消化传代。
 
  1. ADSCs细胞流式检测
可取状态良好的细胞以0.25%胰酶消化成细胞悬液,离心收集细胞沉淀,用0.3Triton X-100溶液作用30minPBS冲洗2次,将其分为2组,同型对照组加非特异性IgG,阳性组加CD13抗体,上流式细胞仪进行检测。
 
  1. ADSCs细胞冻存
干细胞在长期培养传代易受到微生物污染、基因型改变、细胞形态异变等情况的影响,而ADSCs体外长期培养中随着传代次数的增加,容易自发分化,而失去多向分化能力,需要对其进行程序降温后液氮保存。
 
  1. ADSCs细胞临床作用
ADSCs具有取材方便、易培养、分化潜能大,可在体外稳定增殖传代等特点,成为干细胞领域的新热点,其研究应用的领域可涉及到组织工程、心血管疾病、代谢性疾病、关节炎性疾病等多个方面。


[参考文献]
ZuK PA, Zhu M, Mizuno H, et al.Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapyes[J]. Tissue Eng, 2001, 7:211-228.
  Vallee M, Cote Jf, Fradette J, et al.Adipose-tissue engineering: Taking advantage of the properties of human adipose-derived stem/stromal cells [J]. Pathologie Biologie, 2009,57: 309-317.
  Fan Ying, Du Zhenwu, Zhang Yucheng,Zhang Guizhen,Iso lationcultivation and identification of adult ad iposederived stem cells.
 

上一篇

同舟共济 筑梦起“杭” | BIOCHANNEL2024年第二届代理商大会圆满落幕

下一篇

原代细胞与细胞系的培养区别

更多资讯

我的询价