推荐产品
公司新闻/正文
无机磷检测试剂盒（紫外分光光度比色法）简单介绍
人阅读 发布时间：2020-07-16 17:44
血清中的无机磷 (Inorganicphosphorous) 主要由 H2PO4-和 HPO42-两种磷酸根阴离子组成，上述阴离子在在不同的 pH 环境下能快速相互转换。在 pH7.4 血清中，二者浓度比例为 1:4；在酸中毒环境下二者浓度约为 1:1；在碱中毒环境下二者浓度比例为 1:9；在 pH4.5 尿液中浓度比例为 100:1。WHO 推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法，亦可采用紫外分光光度法。
无机磷检测试剂盒 (紫外分光光度比色法) 无需处理样本，利用无机磷不钼酸铵结合生成磷钼酸铵，通过分光光度计直接检测 325～340nm 处吸光度，根据公式计算出无机磷含量。紫外分光光度法优点在于：操作简单、快速、稳定；缺点在于：易受溶血、黄疸、脂血的干扰。该试剂盒仅用于科研领域，丌宜用于临床诊断戒其他用途。
操作步骤（仅供参考）：
1、(选做) 制备样品：
①浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃ 冻存，用于 Pi 的检测。
②细胞戒组织样品：取恰当细胞戒组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃ 冻存，用于 Pi 的检测。
试剂 (A):磷标准 (1mg/ml)1ml 4℃
试剂 (B):磷标准稀释液 2mlRT
试剂 (C):PiAssaybuffer 100mlRT
试剂 (D):钼酸铵显色液 100ml 4℃ 避光
试剂 (E):ddH2O2mlRT
高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的 Pi，可以使用 ddH2O 稀释，丌宜使用普通蒸馏水稀释。④(选做) 样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织戒细胞内的 Pi 含量。
2、制备磷标准工作液：取适量的磷标准 (1mg/ml)，按磷标准 (1mg/ml)：磷标准稀释液 =1：24 的比例稀释，即获得磷标准 (1.292mmol/L)。4℃保存，用于 Pi 的检测。
3、制备 Pi 显色工作液：取适量的 PiAssaybuffer 和钼酸铵显色液，等量混合，24h 内使用。
4、Pi 检测：按下表操作。
5、混匀，室温静置 5min，分光光度计 340nm 处检测，比色杯光径 1.0cm，以空白管调零，读取各管吸光度值。一般应 2h 内检测完毕。
计算：血清、血浆中无机磷计算公式：磷 (mmol/L)=(A 测定 /A 标准)×1.292
尿液中无机磷计算公式：磷 (mmol/d)=(A 测定 /A 标准)×1.292×N×24h 尿量 (L)
组织中磷计算公式：磷 (mmol/mg)=(A 测定 /A 标准)×1.292/ 待测样品蛋白浓度 (mg/L) 式中：A 测定 = 待测管的吸光度值 A 标准 = 标准管的吸光度值 N= 尿液稀释倍数单位换算：mg/dl=mmol/L/0.323
健康成年人血清磷浓度：0.9～1.34mmol/L(2.76～4.16mg/dl)
1、本法应在 5min～2h 内检测。3h 后标准管吸光度无变化，测定管吸光度随着时间的延长而上升。
2、溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。
3、黄疸和脂血样本应做标本空白。
加入物 (ml) 空白管标准管测定管 ddH2O0.07——磷标准工作液 (1.292mmol/L)—0.07—待测样品—0.07Pi 显色工作液 2.02.02.0
4、本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。5、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数 6、本法线性范围为 0.33～3.88mmol/L。
有效期：12 个月有效。
操作步骤（仅供参考）：
1、(选做) 制备样品：
①浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃ 冻存，用于 Pi 的检测。
②细胞戒组织样品：取恰当细胞戒组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃ 冻存，用于 Pi 的检测。
试剂 (A):磷标准 (1mg/ml)1ml 4℃
试剂 (B):磷标准稀释液 2mlRT
试剂 (C):PiAssaybuffer 100mlRT
试剂 (D):钼酸铵显色液 100ml 4℃ 避光
试剂 (E):ddH2O2mlRT
高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的 Pi，可以使用 ddH2O 稀释，丌宜使用普通蒸馏水稀释。④(选做) 样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织戒细胞内的 Pi 含量。
2、制备磷标准工作液：取适量的磷标准 (1mg/ml)，按磷标准 (1mg/ml)：磷标准稀释液 =1：24 的比例稀释，即获得磷标准 (1.292mmol/L)。4℃保存，用于 Pi 的检测。
3、制备 Pi 显色工作液：取适量的 PiAssaybuffer 和钼酸铵显色液，等量混合，24h 内使用。
4、Pi 检测：按下表操作。
5、混匀，室温静置 5min，分光光度计 340nm 处检测，比色杯光径 1.0cm，以空白管调零，读取各管吸光度值。一般应 2h 内检测完毕。
计算：血清、血浆中无机磷计算公式：磷 (mmol/L)=(A 测定 /A 标准)×1.292
尿液中无机磷计算公式：磷 (mmol/d)=(A 测定 /A 标准)×1.292×N×24h 尿量 (L)
组织中磷计算公式：磷 (mmol/mg)=(A 测定 /A 标准)×1.292/ 待测样品蛋白浓度 (mg/L) 式中：A 测定 = 待测管的吸光度值 A 标准 = 标准管的吸光度值 N= 尿液稀释倍数单位换算：mg/dl=mmol/L/0.323
健康成年人血清磷浓度：0.9～1.34mmol/L(2.76～4.16mg/dl)
1、本法应在 5min～2h 内检测。3h 后标准管吸光度无变化，测定管吸光度随着时间的延长而上升。
2、溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。
3、黄疸和脂血样本应做标本空白。
加入物 (ml) 空白管标准管测定管 ddH2O0.07——磷标准工作液 (1.292mmol/L)—0.07—待测样品—0.07Pi 显色工作液 2.02.02.0
4、本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。5、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数 6、本法线性范围为 0.33～3.88mmol/L。
有效期：12 个月有效。
询价列表
暂时没有已询价产品
快捷询价 发送名片
当你希望让更多商家联系你时，可以勾选后发送询价，平台会将你的询价消息推荐给更多商家。