FDCC客户收取细胞注意事项
924 人阅读发布时间:2017-07-05 17:44
FDCC客户收取细胞注意事项
南京森贝伽产品现货供应,价格优惠,质量保证,货期短,产品买的多折扣就多,另有礼品赠送。我司主营现货产品有标准品、染色液、细胞株、培养基、ELISA试剂盒、抗体、血清等,欢迎来电订购!本公司产品仅用于科研使用,不供临床实验。
T25瓶寄送的细胞:
1.客户收到细胞快递当日必须先着重对培养基拍第一组照片,观察是否有漏液和培养基是否颜色变浑浊,是否变异常。不拆封口膜,不开瓶盖用酒精消毒培养瓶外壁后把细胞培养瓶静置在培养箱 1-2h 时拍摄第二组照片;细胞第一次传代后拍摄第三组照片,如果细胞有问题,要每天都有照片记录下来提供给我们。在7天的售后时间内客户若发现细胞有问题,请将三组图片和《FDCC细胞投诉表》一起提供给FDCC,我方会及时处理。显微镜照片要求拍细胞 100X,200X 各2-3张,拍摄照片应清晰(手机拍照,截图等不清晰照片视为不合格照片)。
2.由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请将悬浮的细胞即时离心,加 15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为新的15%血清的完全培养基,培养3天,3 天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请将细胞图片提供给我们,我们会跟进解决。(这里是针对原来完全培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是 20%,可以增加到25%FBS浓度)
3. 客户收到细胞时若无以上两种异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,若为贴壁细胞,未超过 70%汇合度时,(1)若培养液颜色无异常也无明显的细胞碎片,可将培养瓶中的培养液吸出,留 5ml 左右原培养基(T25 细胞培养瓶)继续培养;(2)若培养液颜色异常或有明显的细胞碎片时,请更换新的细胞完全培养液;超过 70%汇合度时,请按照细胞培养条件进行传代培养。我们一般不建议新到货的细胞直接进行冻存。
4.客户收到细胞,原瓶中的培养液若颜色正常且无明显细胞碎片,可以收集继续使用,在第一次消化传瓶时,我们建议客户留一瓶细胞继续使用我们的培养液,其他瓶的细胞可使用客户自己的培养液进行培养,这样可以减少由于细胞不适应培养液导致的问题,请按照细胞处理方法进行操作。
2ml小管细胞寄送的细胞:
1. 收到细胞后,请观察是否有管裂,漏液和污染并拍摄第一组照片,若有以上现象,请立即联系我们;若发现小管中有较多气泡或在管口粘附有较多液体,请先将小管稍加离心;若无以上现象请用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,小心打开管盖,将小管细胞轻轻吹打混匀并将细胞转移至T25培养瓶或10cm培养皿,加入9ml左右无血清培养基混匀,放入培养箱过夜培养12-24h,在显微镜下拍摄第二组照片,观察细胞是否污染,观察细胞状态和汇合度:若未超过70%汇合度,换液继续培养,再视情况传代或者冻存。若超过70%汇合度,可直接进行传代。若收到细胞后将细胞转移至培养瓶/皿24h内观察发现细胞污染或者状态不佳,必须在发现问题的当天拍照立即向我们反馈。细胞长满后第一次传代时请拍摄第三组照片。
干冰件寄送冻存细胞:
1. 客户若收到干冰件寄送的冻存细胞,收到细胞后,请观察细胞冻存管是否完好,冻存管内液体是否融化并拍摄第一组照片,若有以上现象,请立即联系我们;
2. 若无以上现象,按照以下步骤进行细胞复苏:将细胞冻存管立即置于37℃水浴环境中,轻轻摇晃冻存管,使其在1-2 min内融化,冻存管管口用酒精进行消毒,在安全柜中将冻存管内的细胞悬液移至事先装有9ml无血清培养基的15ml离心管中,800rpm/min室温离心5min,收集的细胞沉淀用5-6 ml的完全培养基重悬,将细胞悬液转移到T25细胞培养瓶或者6cm培养皿中。
3. 细胞复苏12-24h后观察细胞状态并拍摄第二组照片,若细胞活率差此时请换新的培养液,并适当提高血清浓度进行培养,若培养3天后细胞状态仍然没有改善,请拍照并及时联系我们。
4. 细胞长满后第一次传代时请拍摄第三组照片。