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南京森贝伽生物科技有限公司品牌商
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京森贝伽生物科技有限公司（NanJing SenBeiJia Biotechnology Co.,LTD.），是一家集研发、生产、销售为一体的高新技术企业，专注于生命科学和生物技术研究，产品涵盖分子生物学、蛋白质组学、免疫学、细胞生物学等研究和应用领域。公司总投资超过 2000 万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。森贝伽生物自主研发的 ELISA 试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
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抗体
已认证品牌介绍
SANTA CRUZ公司是全球最大的抗体生产厂商之一，目前公司提供二万余种研究用的第一抗体，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。
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公司新闻/正文
细胞培养出现问题了怎么办
587 人阅读发布时间：2016-11-01 17:50
细胞培养出现问题了怎么办
南京森贝伽产品火热促销中，主营产品有ELISA试剂盒、血清、细胞株、培养基、标准品、染色液、抗体等，我司与各大高校医院均有合作。产品价格优惠，质量保证，产品买的多折扣就多，另有礼品赠送，欢迎来电订购！本公司产品仅用于科研使用，不供临床实验。细胞培养过程中会出现一些问题，比如：细胞无法在培养皿上贴壁生长，细胞生长缓慢，细胞死亡等。那么该如何解决呢？
一、细胞无法在培养器皿上贴壁生长
1.细胞胰酶消化过度：缩短胰酶消化时间或减少胰酶用量。
2.支原体污染：隔离细胞，检测是否感染支原体；清洗通风厨和培养箱，如细胞被污染，灭菌处理后丢弃。
3.培养基中无附着因子：如果使用的是无血清配方，应确保含有附着因子或者使用经过包被的培养板。
二、细胞生长缓慢
1.培养基或血清改变：比较不同培养基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有无差异；通过生长实验比较新老批次血清有无差异；增大细胞初始接种密度；使细胞逐步适应新的培养基。
2.必需生长促进成分（如L-谷氨酰胺或生长因子）耗竭、缺乏或分解：去除原培养基，加入新鲜培养基；向培养基中添加生长促进成分（如L-谷氨酰胺）。
3.轻度细菌或真菌污染：在不添加抗生素的条件下进行培养，如细胞被污染，灭菌处理后丢弃。
4.时间存储不当：血清应于-5℃至-20℃下储存；培养基应于2℃~8℃下避光储存；尽量减少血清和培养基见光时间。
5.细胞初始接种密度低：增大活细胞接种密度。
6.细胞衰老、老化：将老化细胞丢弃，取用代数较少的细胞。
7.支原体污染：隔离细胞，检测是否感染支原体；清洗通风厨和培养箱，如细胞被污染，灭菌处理后丢弃。
三、培养基pH值变化迅速
1.培养箱CO2分压设置错误：根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压，NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时，应相应地使用5%-10%的CO2分压。
2.细胞培养瓶瓶盖过紧：将瓶盖旋松1/4圈。
3.碳酸氢盐缓存系统缓冲能力不足：加入HEPES缓冲液，使其终浓度为10-25mM。
4.培养基中盐含量不正确：CO2平衡环境中使用以Earle平衡盐为基础的培养基，大气条件下使用以Hanks平衡盐为基础的培养基。
5.细菌、酵母或真菌污染：将细胞和培养基灭菌处理后丢弃。
四、细胞凋亡
1.培养箱中无CO2：监测培养箱中CO2使用速度以便确定及时更换气瓶；经常检测管路连接处是否漏气；不要频繁开启培养箱门。
2.培养箱内温度有波动：监测培养箱内温度，及时校正。
3.使用抗生素达到毒性浓度：减少抗生素的用量；使用无血清培养基时，抗生素浓度应降低至1/10。
4.细胞复苏或冻存时受到损伤：取用新的细胞。
5.培养基的渗透压不合适：检查完全培养基的渗透压。大多数哺乳动物细胞可耐受260~350mOsm/kg的渗透压，加入某些试剂和药物后会影响培养基的渗透压；昆虫细胞培养基的渗透压（340~380mOsm/kg）要高于哺乳动物细胞。
6.培养基中毒性代谢产物蓄积：去除原培养基，换用新鲜培养基。
五、悬浮细胞集成团
1.存在钙离子和镁离子：用不含钙离子和镁离子的平衡盐溶液清洗细胞，轻轻吹打细胞，使其形成单细胞悬液。
2.支原体污染：隔离细胞，检测是否感染支原体；清洗通风厨和培养箱，如细胞被污染，灭菌处理后丢弃。
3.蛋白水解酶消化过度导致细胞裂解、DNA释放：用0.001%DNA酶I处理细胞；用PBS冲洗后再接种到新培养基中。