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2203 人阅读发布时间:2021-06-22 14:06
一、抗体的稳定性
1. 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果。抗体是免疫系统中最重要的分子之一,其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中,抗体分子形成了保守而稳定的结构。
2. 抗体分子的高 Tm 值。在室温下,甚至短时间温度达到 50-60℃,抗体分子都能维持正确折叠,保持应有的活性。
3. 抗体的纯度。采用先进的抗体纯化技术,确保抗体产品的高纯度,保障其抗体产品的稳定性。
4. 抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失,高浓度的抗体稳定性更好,抗体产品中 93% 的浓度大于 0.5mg/ml。
二、怎样确定抗体购买渠道和品牌?
国外著名抗体品牌的质量一般没问题,但价格较贵,而且很多抗体品牌本身不生产抗体,所以能找到 OEM 抗体生产商生产的原装进口抗体,随着网络技术的越来越普及,我们自己就可以通过国内外的相关网站来检索,国外最大的生物试剂查询网站:biocompare,国内最大的生物试剂查询网站:丁香通,来查找我们所需要的产品资料。
三、怎样保存已获得的抗体?
抗体无论是保存还是运输都应尽可能地避免反复冻融,收到抗体后请根据实验的需要,对抗体进行分装,避免同一管抗体反复冻融(反复冻融会导致抗体空间结构变 性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力)。抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果,如果抗体保存得当,抗体活性大部分都可以维持数年。 请谨记,无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确处理和保存抗体。
1. 收到抗体后,请务必在 4℃,12000rpm,离心 3 分钟,(无论是液体还是冻干粉状态),再打开管盖进行分装和保存(如果抗体体积小于 50ul,请延长 离心时间至 5 分钟,以保证全部抗体均离心下来)。抗体一般使用特制的储存管,只有在 12000rpm 离心 3 分钟,才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下 来(即使是在 10000rpm 离心也会离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象)。
2. 对于 ProSci 大部分抗体,比较合适的保存方式是,分装后保存在-20℃或者-80℃。
(1)对绝大多数抗体来说,保存在-20℃就完全足够了,没有任何证据显示保存在-80℃会更好。
(2)分装可以降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
(3)分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于 10ul 每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。
(4)复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在 4℃,避免再冻起来。
(5)抗体工作液应该当天配制当天用完,4℃保存尽量不要超过 1 天。
(6)避免将抗体保存在自动除霜冰箱中,将抗体保存在冰箱里层,避免温度变化造成反复冻融。
3. 大部分抗体收到后 4℃ 短暂保存 1~2 周对抗体活性没有影响。
4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要 1~2 周的时间,所以是在低温 4℃ 的条件下来完成的。
4℃ 运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以运输过程中避免干冰运输。